创新成果转换中心
1、细胞智能规模化制备工艺核心产品
2、细胞培养工艺——成分限定培养基
该工艺使用专为人源间充质干细胞仿生培养定制的成分限定培养基,无血清、无异源成分,可以维持MSCs长时间培养扩增及多次传代,同时能较好地维持其多种分化潜能。


3、全自动外泌体纯化系统
按照中国食品药品企业安全管理促进会发布的《人源间充质干细胞外泌体制备与检验规范》实施。相比于传统外泌体分离设备,我司采用的全自动外泌体纯化仪成功实现一系列复杂分离步骤的自动化,可以大幅降低人工成本,提升大体积样本处理效率,分离出高纯度、更安全的外泌体样本。
收集10L培养上清,可提取收获1-5×1012个外泌体
4、外泌体质量控制
通过高清触控屏进行便捷操作,通过智能程序实现人机交互,一键操作更便捷。
第一步:消毒和清洗,第二步:分离纯化样本进入仪器后,先经过除杂系统,去除杂质,再通过分子筛浓缩纯化系统完成纯化,分离获得外泌体样本。


5、脐带间充质干细胞上清液
本发明涉及一种脐带间充质干细胞上清液在皮肤修复以及抗衰老护肤品中的制备方法及应用。本发明基于脐带中富含有抗氧化多肽的特点,从脐带中分离鉴定获得了一个具有较强抗氧化的特性多肽D25-F7,所述多肽具有较强的DPPH清除能力以及ABTS的清除能力, 对H2O2诱导的HDF细胞损伤具有保护作用。
将所述多肽与脐带间充质干细胞上清液一起制备成为组合物使用后能够有效的提高皮肤中的羟脯氨酸含量,能够显著的使得P53 蛋白表达降低量,有效的实现了抗氧化的效果,市场应用价值较好。
实验一:抗氧化多肽活性鉴定
结论:
SEQ ID NO:1的多肽D25-F3具有更强的抗氧化特性,与SEQ ID NO:2多肽 D25-F7相比针对DPPH清除能力以及ABTS的清除能力均显著提高(P<0.01)。
结论:
实验结果表明多肽具有对H2O2诱导的HDF细胞损伤具有保护作用,并且随着浓度的增加保护效应逐渐提高,且有剂量依赖性,在100μg/mL的多肽浓度下,荧光强度低至(18.26±1.43)%,显著的低于模型组的(99.86±5.97)%。
结论:
脐带间充质干细胞培养上清液可抑制H2O2诱导的成纤维细胞衰老进程,采用D25-F3多肽培养脐带间充质干细胞获得上清液具有更强的抑制HDF衰老的特性。
6、间充质干细胞上清液滴眼液
干眼综合征是因泪液的质或者量发生改变而导致泪膜相对稳定性下降及眼球表面功能的侵害的一类眼表疾病,临床表现为眼部的刺痛感、干涩感、 畏光感、异物感、灼烧感、眼表损害、视觉功能紊乱等。它可引起不适、视力障碍和泪膜不稳定。
目前西医治疗干眼综合征主要是以缓解症状、改善体征为主,治疗方法主要包括物理治疗、药物治疗、自体血清及富血小板血浆替代治疗等。当物理治疗和药物治疗效果欠佳时,可考虑给予手术治疗。手术方式主要是显微 15 探针疏通术、泪道塞法与腺体移植术。间质性干细胞移植也可对干眼综合征进行有效治疗。
间充质干细胞的培养上清液中包含有多种细胞因子,间充质干细胞的培养上清液已经被广泛应用于多个领域,经研究表明,MSCs具有自分泌和旁分泌功能,能够在局部分泌多种蛋白,引导细胞的迁移、分化,改善局部供血功能、消除局部炎症反应。
选择传代培养生长状态良好,处于对数增长期的脐带间充质干细胞,经0.2%胰酶消化制成单细胞悬液进行流式细胞术检测其表面抗原的表达情况。
结论:
流式细胞仪检测所制备的间充质干细胞的表面表达抗原 CD44、CD105 以及 I 类抗原 HLA-ABC,但是不表达 CD19、CD31 以及 II 类抗原HLA-DR,证明制备的间充质干细胞正常。
图 3A 为 EGF 含量检测结果(pg/mL),
图 3B 为IGF-1 检测结果(pg/mL),
图 3C 为 KGF-2 含量检测结果(pg/mL),
图 3D为 IL-10 含量检测结果(pg/mL)。
结论:
从测定结果来看,通过添加 KRN 7000 的培养基上清,其中的细胞因子 igf-1、EGF、KGF-2、 IL-10 的表达均大幅度提高。


结论:
采用制备的滴眼剂进行一段时间的治疗后,白兔
的干眼症症状均有所缓解,其中,添加 KRN 7000 诱导的培养基上清制备的滴眼剂,恢复效果明显优于未添加 KRN 7000 的培养基上清制备的滴眼剂。
7、干细胞骨关节修复
国内治疗情况
中国骨关节炎患者的常规治疗包括口服消炎药止痛和氨基葡萄糖类药物、关节腔内注射玻璃酸钠、物理治疗和外科手术等,但效果并不理想。
美国骨科医师学会(AAOS)唯一推荐的骨关节炎治疗药物为非甾体类抗炎止痛药,然而该类药物却无法延缓关节软骨磨损和骨关节炎的进展。
干细胞修复原理
干细胞通过关书腔内注射,达到关节腔能够进行长期的自我复制,生长,分化,增殖,可以适应不规则的骨缺损及软骨缺损,促进半月板和骨体积增加,还可以加速不全撕裂的肌腱韧带的愈合,有效改善关节功能。


(多向分化,自我更新)
干细胞在不同分化发育阶段,细胞数量发生动态变化,分泌活性因子,促进细胞基质成分生成,并促进血管生成,改善关节腔内的微循环。
(分泌作用)
间接调节树突细胞和自然杀伤细胞,抑制T淋巴细胞的增殖,阻止T细胞反应,以及炎性细胞因子,减低了关节腔内局部微环境中免疫性细胞间的相互作用,促进炎性水肿吸收,从而改善症状。


(免疫调节功能)

结论:
相比于空白对照而言,过表达 CircRNA-220 的软骨细胞的增殖能力明显得到改善。因此,可通过过表达 CircRNA-220 调控软骨细胞的增殖,来用于半月板和骨关节修复。

结论:
相比于对照组而言,实验组处理下的半月板修复显著提高,且差异极其显著。
由此证明,本发明实施例得到的组合物可用于修复半月板损伤。
结论:
在连续施用本发明实施例所述组合物后,受体骨关节疼痛症状得到明显缓解,同时骨关节功能也得到改善。

